УРОВЕНЬ КОФЕРМЕНТА НАД+ В ФОЛЛИКУЛЯРНОЙ ЖИДКОСТИ КАК ПРЕДИКТОР ЖЕНСКОЙ ФЕРТИЛЬНОСТИ

Цель. Изучить уровень и редокс-статус никотинамидных коферментов фолликулярной жидкости у женщин репродуктивного возраста.
Материал и методы. Исследование проведено на базе клиники ВРТ «Семья» г. Уфы. Обследовано 65 пациенток в возрасте от 23 до 50 лет (средний возраст 32,3±3,6 года). Основную группу составили 45 пациенток репродуктивного возраста из бесплодных супружеских пар. В группу сравнения вошли 20 фертильных женщин, обратившихся в ту же клинику для прохождения профилактического осмотра. Для измерения концентрации НАД+ в фолликулярной жидкости использовали колориметрический метод (NAD/NADH Cell-Based Assay Kit, Cayman Chemical) на 96-луночном планшетном анализаторе, измеряющем оптическую плотность при длине волны 450 нм. Для анализа использовали 100 мкл супернатанта фолликулярной жидкости. Редокс-потенциал (соотношение НАД/НАДН) определяли с использованием тест-системы SigmaAldrich.
Результаты исследования. При уровне НАД+ в интервале, равном 56-76 нмоль/мг белка фолликулярной жидкости, подтверждалась фертильность ооцитов. При концентрации НАД+ ниже этого диапазона диагностировали бесплодие. Разработанный способ рекомендуется применять для оценки женской фертильности в практической гинекологии и репродуктологии как эффективный метод прогнозирования развития женского бесплодия неясной этиологии.
Заключение. Предложенный и апробированный во врачебной практике способ обеспечивает повышение точности, специфичности и упрощения диагностики женского бесплодия на основе оценки редокс-потенциала ооцитов посредством определения в них уровня НАД+. Данный способ позволяет выявить нарушения окислительно-восстановительных процессов, в том числе сопряженных с различными формами патологии митоходрий, и процессов репарации ДНК, регуляции апоптоза и ранним старением яйцеклеток.

1. The definition of unexplained infertility: A systematic review / C. Raperport, J. Desai, D. Qureshi [et al.] // BJOG. – 2023. doi: 10.1111/1471-0528.17697.

2. Faddy, M.J. Follicle dynamics during ovarian ageing / M.J. Faddy // Mol. Cell. Endocrinol. – 2002. – Vol. 163, № 1–2. – P. 43-48.

3. Improvements in IVF in women of advanced age / N. Gleicher, V.A. Kushnir, D.F. Albertini [et al.] // J. Endocrinol. – 2016. – Vol. 230, № 1. – P. F1–F6.

4. Increasing ovarian NAD+ levels improve mitochondrial functions and reverse ovarian aging / Q. Yang, L. Cong, Y. Wang [et al.] // Free Radic Biol Med. – 2020. – Vol. 156. – P. 1-10.

5. Research progress on mitochondrial damage and repairing in oocytes: A review / Z. Yang, S. Liu, X. Pan / Mitochondrion. – 2024. – Vol. 75. – P. 101845.

6. Роль митохондрий сперматозоидов в возникновении и развитии мужского бесплодия / П.Ф. Литвицкий, К.Ш. Галимов, Ю.Ю. Громенко [и др.] // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. – 2022. – Т. 66, № 2. – С. 72-79.

7. Zhang, W. Effects of adverse fertility-related factors on mitochondrial DNA in the oocyte: a comprehensive review / W. Zhang, F. Wu // Reprod. Biol. Endocrinol. – 2023. – Vol. 21, № 1. – P. 27.

8. NAD(+) metabolism and the control of energy homeostasis: a balancing act between mitochondria and the nucleus / C. Canto, K.J. Menzies, J. Auwerx // Cell Metabol. – 2015. – Vol. 22, № 1. – P. 31-53.

9. Kasapoglu, I. Mitochondrial dysfunction and ovarian aging / I. Kasapoglu, E. Seli // Endocrinology. – 2020. – Vol. 161, № 2. – P. bqaa001.

10. The level of secondary messengers and the redox state of NAD+/NADH are associated with sperm quality in infertility / S.N. Galimov, E.F. Galimova, J.Y. Gromenko [et al.] // Journal of Reproductive Immunology. – 2021. – Vol. 148. – P. 103383.

11. Nicotinamide riboside supplementation ameliorated post-ovulatory oocyte quality decline / H. Li, H. Wang, J. Xu [et al.] // Reproduction. – 2022. – Vol. 165, № 1. – P. 103-111.

12. NAD(+) repletion rescues female fertility during reproductive aging / M.J. Bertoldo, D.R. Listijono, W.J. Ho [et al]. // Cell Rep. – 2020. – Vol. 30, № 6. – P. 1670-1681.e7.

13. Способ диагностики женской фертильности; патент № 2807923 Рос. Федерация; заявл, 28.02.2023; опубл. 21.11.2023. Бюл. № 33, 8 с.

14. Cellular and Mitochondrial NAD Homeostasis in Health and Disease / J. Waddell, R. Khatoon, T. Kristian // Cells. – 2023. – Vol. 12, № 9. – P. 1329.

15. NADase CD38 is a key determinant of ovarian aging / Q. Yang, W. Chen, L. Cong [et al.] // Nat. Aging. – 2024. – Vol. 4, № 1. – P. 110-128.

16. Активация ооцитов: фундаментальные и клинические аспекты / Ю.Ю. Громенко, Э.Ф. Галимова, Д.Д. Громенко [и др.] // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. – 2020. – Т. 19, № 5. – С. 77-85.

17. Altered Energy Metabolism, Mitochondrial Dysfunction, and Redox Imbalance Influencing Reproductive Performance in Granulosa Cells and Oocyte During Aging // H. Kobayashi, C. Yoshimoto, S. Matsubara [et al.] // Reprod Sci. – 2023. doi: 10.1007/s43032-023-01394-7.

18. Мужское бесплодие: молекулярные и иммунологические аспекты / Ш.Н. Галимов [и др.]. – М., 2020. – 208 с.

19. Study of human follicular fluid metabolomics, study of follicle development and quality eggs / Z. Sun, H. Wu, F. Lian [et al.] // Chromatography. – 2017. – Vol. 80. – P. 901-909.

20. Способ прогнозирования мужского бесплодия на основе анализа фрагментации ДНК сперматозоидов: патент № 2804207 Рос. Федерация; заявл. 27.04.2023; опубл. 26.09.2023.

21. The relationship between the metabolic and lipid profile in the follicular fluid of women undergoing in vitro fertilization // S. Luti, T. Fiaschi, F. Magherini [et al.] // Mol. reproduction. dev. – 2020. – Vol. 87. – P. 986-997.

22. Молекулярные аспекты влияния комплекса Сперотон на мужскую фертильность при идиопатическом бесплодии / Ш.Н. Галимов, Р.М. Ахметов, Э.Ф. Галимова [и др.] // Урология. – 2017. – № 2. – С. 88-92.